|
|
Možnosti přípravy lidských glykoproteinů v semenech luštěnin
Ploužková, Tereza ; Ryšlavá, Helena (vedoucí práce) ; Vaněk, Ondřej (oponent)
Exprese rekombinantních proteinů v semenech je výhodná zejména kvůli vysoké koncentraci zásobních proteinů v malém objemu. Rekombinantní proteiny se v semenech akumulují ve vysokých koncentracích, zůstávají stabilní řadu let a díky nízkému obsahu alkaloidů a dalších látek nejsou semena náročná na další zpracování. Mezi další výhody řadíme minimální riziko kontaminace. Bakalářská práce se zabývá testováním transientní exprese genových konstruktů přímo v dozrávajících semenech sóji. V rámci této práce byly připraveny genové konstrukty pro testování transientní exprese genu uidA. Také byl studován vliv aditiv acetosyringonu a dithiothreitolu a jejich kombinací na transientní expresi a aktivitu genu uidA. Dále byla studována optimální délka a prostředí sonikace. Na závěr byla také porovnána účinnost transientní exprese metodou in vitro a in vivo. Bylo potvrzeno, že acetosyringon má pozitivní vliv pouze na semena, která nebyla předem sonikována. S prodlužující se sonikací klesá relativní aktivita genu uidA. Dále byl zjištěn pozitivní vliv dithiothreitolu u nesonikovaných semen. Vyšší hodnoty sledované relativní aktivity genu uidA byly také zaznamenány po přidání obou aditiv do infiltračního pufru. Jako optimální délka sonikace byla zjištěna 30 s sonikace v případě metody in vitro a 60 s u in vivo...
|
|
|
Využití rostlin při přípravě vakcín proti lidskému papillomaviru
Dlabalová, Lucie ; Moravec, Tomáš (vedoucí práce) ; Fischer, Lukáš (oponent)
Papillomaviry způsobují různá onemocnění od kožních bradavic až po léze vedoucí ke vzniku maligních nádorů. Mezi lidmi jsou velice rozšířeny. Proto se v současnosti vyvíjí metody produkce levných a účinných vakcín jak pro jejich prevenci tak i terapii nádorů. V současnosti jsou k produkci farmaceutik nejčastěji používány živočišné a mikrobiální expresní systémy, které mají mnoho nevýhod a v budoucnu nemohou pokrýt poptávku. Otevírá se tak možnost využití rostlin jako potenciálně velmi efektivních producentů léčiv. Rostlinné expresní systémy se optimalizují a dochází ke zvyšování výtěžků, intenzivně se hledají cesty jejich nejlepšího a nejbezpečnějšího způsobu využití. Tato práce shrnuje a porovnává výhody a nevýhody různých způsobů transformací rostlin, vedoucí buď ke stabilní produkci požadovaného proteinu v transgenních rostlinách, nebo přechodné expresi prostřednictvím rekombinantního rostlinného viru infikujícího netransgenní rostliny. Dále hledá nejvhodnější rostlinné druhy, poskytující vysoké výtěžky ve spojení s určitou transformační metodou a umožňující snadný způsob pěstování, popisuje několik základních způsobů optimalizací exprese a nastiňuje budoucnost rostlinných expresních systémů.
|
|
|
Porovnání účinnosti přímé a nepřímé metody genetické transformace u bramboru (Solanum tuberosum L.)
PŘIBYLOVÁ, Marie
Brambory jsou jednou z hlavních plodin, u nichž je cílený přenos genů vhodnou metodou pro zlepšení vlastností stávajících odrůd. Cílem této práce bylo porovnání účinnosti genetické transformace bramboru, odrůdy Bintje, jednak prostřednictvím bakterií Agrobacterium tumefaciens a jednak mikroprojektily. V obou případech byla internodia bramboru transformována shodným plazmidem p35SGUSint, který se skládá z 35S CaMV promotoru a genů gus (s vloženým intronem) a nptII. Pro získání transgenních rostlin, jejich identifikaci a analýzu byly použity metody selekce na kanamycinu, tranzientní a stabilní exprese enzymu {$\beta$}-glukuronidázy a amplifikace genů gus a nptII pomocí PCR.
|
host ::
RSS.